බහු පීසීආර් කට්ටලය
විශේෂාංග
Specific ඉහළ නිශ්චිතතාව: ඉහළ නිශ්චිත විස්තාරණය සහතික කිරීම සඳහා රසායනිකව වෙනස් කළ උණුසුම් ආරම්භක එන්සයිම සක්‍රිය කිරීමේ කාලය විනාඩි 15 දක්වා.
■ ඉහළ සංවේදීතාව: අඩු පිටපත් විස්තාරණය සහ බහුකාර්ය පීවීආර් හි ඉහළ කාර්යක්ෂමතා විස්තාරණය.
Operation සරල ක්‍රියාකාරිත්වය: අඩු උෂ්ණත්වයේ සහ කාමර උෂ්ණත්වයේ දී එන්සයිමය අක්‍රිය වන අතර ප්‍රතික්‍රියාකාරක කාමර උෂ්ණත්වයේ දී සකස් කළ හැකිය.
ක්රියාකාරකම් අර්ථ දැක්වීම
1 ඒකකය (යූ) හොට්ස්ටාර්ට් ටැක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් ක්‍රියාකාරිත්වය අර්ථ දැක්වෙන්නේ සාර්‍ථක සැමන් ශුක්‍රාණුව ඩීඑන්ඒ භාවිතා කර විනාඩි 30 ක් ඇතුළත මිනිත්තු 30 ක් ඇතුළත අම්ල-ද්‍රාව්‍ය නොවන ද්‍රව්‍ය බවට එන්සයිමල් 10 ක් එකතු කිරීම සඳහා අවශ්‍ය එන්සයිම ප්‍රමාණය ලෙස ය.
ප්රධාන තාක්ෂණික පරාමිතීන්
එයට 5′-3 ′ එක්ස්‌යුනියුක්ලීස් ක්‍රියාකාරකම ඇති අතර ශක්තිමත්ම නිශ්චිතතාවයෙන් යුත් 3 ′-5 ′ එක්සෝනියුක්ලීස් ක්රියාකාරකම් නොමැත. PCR නිෂ්පාදනයේ 3 ′ අවසානය A වන අතර එය TA ක්ලෝනකරණය සඳහා කෙලින්ම භාවිතා කළ හැකිය.
පිරිවිතර
වර්ගය: රසායනිකව වෙනස් කරන ලද හොට්ස්ටාර්ට් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස්
යෙදුම්: මල්ටිප්ලෙක්ස් පීසීආර් අත්හදා බැලීම, ඉහළ නිශ්චිතභාවය හඳුනා ගැනීමේ අත්හදා බැලීම, අඩු පිටපත් ජානය වැඩි කිරීම, සංකීර්ණ ව්‍යුහයන් සහිත ආකෘති පීසීආර් වැඩි කිරීම (ජානමය ඩීඑන්ඒ, සීඩීඑන්ඒ යනාදිය).
සියලුම නිෂ්පාදන ODM/OEM සඳහා රිසිකරණය කළ හැකිය. විස්තර සඳහා,කරුණාකර අභිරුචි සේවාව (ODM/OEM) ක්ලික් කරන්න
  |
විවිධ කොටස් 7 (100 bp-1000 bp) වැඩි කිරීමට මිනිස් ජෙනෝමය අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරන්න. සටහන: Multiple මල්ටිප්ලෙක්ස් පීසීආර් හි විවිධ දිග වැඩි කිරීමේ කාලය දීර්ඝ කිරීමේ කාලය තීරණය කිරීම: 500 බීපී වලට අඩු කොටස් සඳහා තත්පර 60 දක්වා දිගු කරන්න; 500-1500 බීපී කොටස් සඳහා තත්පර 90 දක්වා දිගු කරන්න; 2000 bp ට වැඩි කොටස් සඳහා තත්පර 120 ක් දක්වා දිගු කරන්න. එන්සයිම ක්රියාකාරකම් ප්‍රමාණවත් ලෙස මුදා හැරීම සහතික කිරීම සඳහා උණුසුම් ආරම්භයට 95 ° C දී විනාඩි 15 ක් උණුසුම් කිරීම අවශ්‍ය වේ. |
A-1 සැකිල්ල
Temp අච්චුවේ ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය හෝ ටාක් නිෂේධක ආදිය අඩංගු වේ - ඩීඑන්ඒ සැකිල්ල පිරිසිදු කරන්න, ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කරන්න හෝ පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල සමඟ ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කරන්න.
Temp සැකිල්ල අවලංගු කිරීම සම්පුර්ණ නැත ——අනුශ්‍රිත කිරීමේ උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස ඉහළ නංවන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
Mp අච්චු පිරිහීම ——අච්චුව නැවත සකස් කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිමර්
ප්‍රයිමර් වල දුර්වල ගුණාත්මකභාවය ——ප්‍රථමකය නැවත සංස්ලේෂණය කරන්න.
■ ප්‍රාථමික පිරිහීම —— සංරක්‍ෂණය සඳහා ඉහළ සාන්ද්‍රණ ප්‍රයිමර් කුඩා පරිමාවක් බවට පත් කරන්න. බහු ශීත කිරීම සහ දියවීම හෝ දිගු කාලීන 4 ° C ක්‍රියෝප්‍රීසර්වඩ් කිරීමෙන් වළකින්න.
ප්‍රයිමර් වල නුසුදුසු සැලසුම (උදා: ප්‍රයිමර් දිග ප්‍රමාණවත් නොවීම, ප්‍රයිමර් අතර සෑදු ඩිමර් ආදිය) -ප්‍රතිනිර්මාණ ප්‍රයිමර් (ප්‍රයිමර් ඩිමර් සහ ද්විතීයික ව්‍යුහය සෑදීමෙන් වළකින්න)
ඒ -3 මි.මී.2+සාන්ද්රණය
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
ඉහළ උෂ්ණත්වය ඉහළ යාම සහ ප්‍රාථමිකය සහ සැකිල්ල බන්ධනයට බලපායි. ————————————————————————————————————————————————————22 ° C ක අනුක්‍රමණයකින් තත්වය වැඩි දියුණු කරන්න.
A-5 දිගු කිරීමේ කාලය
Extension කෙටි දිගු කාලය —— දිගු කිරීමේ කාලය වැඩි කිරීම.
සංසිද්ධි: samplesණාත්මක සාම්පල මඟින් ඉලක්කගත අනුක්‍රමික කලාප ද පෙන්වයි.
A-1 PCR දූෂණය වීම
Target ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල හෝ විස්තාරණ නිෂ්පාදන වල හරස් දූෂණය - theණාත්මක සාම්පලයේ ඉලක්කගත අනුක්‍රමය අඩංගු නියැදිය නියමාකාරයෙන් නල මාර්ගයට ගෙන ඒම හෝ කේන්ද්‍රාපසාරී නලයෙන් පිටතට වත් නොකිරීම. පවතින න්‍යෂ්ටික අම්ල ඉවත් කිරීම සඳහා ප්‍රතික්‍රියාකාරක හෝ උපකරණ ස්වයංක්‍රීයව සවි කළ යුතු අතර negativeණාත්මක පාලන අත්හදා බැලීම් තුළින් අපවිත්‍ර වීමේ පැවැත්ම තීරණය කළ යුතුය.
Ag ප්‍රතික්‍රියාකාරක අපවිත්‍ර වීම —— ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඉවත් කර අඩු උෂ්ණත්වයක ගබඩා කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිම්r
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
Pri නුසුදුසු ප්‍රාථමික සැලසුම සහ ඉලක්කගත අනුපිළිවෙලට ඉලක්ක නොවන අනුපිළිවෙල සමඟ සමජාතීයතාවයක් ඇත. ——ප්‍රාථමිකයන් නැවත සැලසුම් කරන්න.
සංසිද්ධි: පීසීආර් ඇම්ප්ලිෆිකේෂන් බෑන්ඩ් අපේක්‍ෂිත ප්‍රමාණයට නොගැලපේ, විශාල හෝ කුඩා හෝ සමහර විට විශේෂිත විස්තාරණ පටි සහ විශේෂිත නොවන විස්තාරණ පටි.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්
Pri දුර්වල ප්‍රාථමික විශේෂතා
—— නැවත සැලසුම් කිරීමේ ප්‍රාථමිකය.
Pri ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළයි ——අනුකරණය කිරීමේ උෂ්ණත්වය නියමිත ලෙස වැඩි කරන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
ඒ -2 මිග්2+ සාන්ද්රණය
G එම්ජී2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg2+ සාන්ද්රණය නිවැරදිව අඩු කරන්න: එම්ජී උපරිම කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
ඒ -3 තාප ස්ථායී පොලිමරේස්
En අතිරික්ත එන්සයිම ප්‍රමාණය —— 0.5 යූ කාල පරතරයන් තුළ එන්සයිම ප්‍රමාණය සුදුසු ලෙස අඩු කරන්න.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
Neඅනෙහි උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුයි ——අනුරූපී උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස වැඩි කිරීම හෝ අදියර දෙකක ඇනීමේ ක්‍රමය අනුගමනය කිරීම
A-5 PCR චක්‍ර
PCR චක්‍ර ඕනෑවට වඩා —— PCR චක්‍ර ගණන අඩු කරන්න.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්————————————————————Oor නැතහොත් කූඩු කළ PCR සිදු කරන්න.
ඒ -2 ආකෘති ඩීඑන්ඒ
--— සැකිල්ල පිරිසිදු නැත ————————————————————————————————————
ඒ -3 මි.මී.2+ සාන්ද්රණය
——Mg2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg නිසි ලෙස අඩු කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 dNTP
- ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය - ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය නිසි පරිදි අඩු කරන්න
A-5 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
—————————————————————————————————————————————————————————————————
ඒ -6 පාපැදි
—————————————————————————————————————————————————————————————————————————
පළමු පියවර වන්නේ සුදුසු පොලිමරේස් තෝරා ගැනීමයි. නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් වලට 3'-5 'එක්සෝනියුක්ලීස් ක්‍රියාකාරිත්වය නොමැතිකම නිසා සෝදුපත් කියවිය නොහැකි අතර නොගැලපීම මඟින් කොටස් වල දිගු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව බෙහෙවින් අඩු කරයි. එම නිසා නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් මඟින් 5 kb ට වඩා වැඩි ඉලක්ක කොටස් ඵලදායීව විස්තාරණය කළ නොහැක. දීර්ඝ කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව ඉහළ නැංවීම සහ දිගු කොටස් විස්තාරණ කිරීමේ අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා විශේෂ වෙනස් කිරීම් සහිත ටැක් පොලිමරේස් හෝ වෙනත් ඉහළ විශ්වාසවන්ත පොලිමරේස් තෝරා ගත යුතුය. ඊට අමතරව, දිගු කොටස් විස්තාරණය කිරීම සඳහා ප්‍රාථමික සැලසුම, විරූපණය කිරීමේ කාලය, දිගු කිරීමේ කාලය, ස්වාරක්ෂක පීඑච් යනාදිය ද ඊට අනුරූපව ගැලපීම අවශ්‍ය වේ. සාමාන්‍යයෙන් 18-24 බීපී සහිත ප්‍රයිමර් මඟින් හොඳ අස්වැන්නක් ලබා ගත හැකිය. සැකිල්ලට වන හානිය වළක්වා ගැනීම සඳහා, 94 ° C දී විරේචනය වීමේ කාලය එක් චක්‍රයකට තත්පර 30 ක් හෝ ඊට අඩු කළ යුතු අතර, විස්තාරණය වීමට පෙර උෂ්ණත්වය 94 ° C දක්වා ඉහළ නැංවීමේ කාලය මිනිත්තු 1 කට වඩා අඩු විය යුතුය. එපමණක් නොව, දිගු කිරීමේ උෂ්ණත්වය 68 ° C පමණ දක්වා සකස් කිරීම සහ දීර්ඝ කිරීමේ කාලය 1 kb/min අනුපාතය අනුව සැලසුම් කිරීමෙන් දිගු කොටස් වල ඵලදායී විස්තාරණය සහතික කළ හැකිය.
ඉහළ විශ්වාසවන්ත භාවයකින් යුත් විවිධ ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් භාවිතා කිරීමෙන් පීසීආර් විස්තාරණයේ වැරදි අනුපාතය අඩු කළ හැකිය. මෙතෙක් සොයාගෙන ඇති සියලුම ටාක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් අතර, පීඑෆ්යු එන්සයිමයේ අවම දෝෂ අනුපාතය සහ ඉහළම විශ්වාසවන්තභාවය ඇත (අමුණා ඇති වගුව බලන්න). එන්සයිම තෝරා ගැනීමට අමතරව, පර්යේෂකයන්ට පීසීආර් විකෘති අනුපාතය තවදුරටත් අඩු කළ හැකි අතර එමඟින් බෆර් සංයුතිය ප්‍රශස්ත කිරීම, තාප ස්ථායී පොලිමරේස් සාන්ද්රණය සහ පීසීආර් චක්‍ර අංකය ප්‍රශස්තිකරණය කිරීම ඇතුළත් වේ.
නිෂ්පාදන කාණ්ඩ
අපව තෝරා ගන්නේ ඇයි
අපගේ කර්මාන්ත ශාලාව පිහිටුවීමෙන් පසු මූලධර්මය පිළිපදිමින් පළමු ලෝක මට්ටමේ නිෂ්පාදන සංවර්ධනය කරමින් සිටියේය
පළමුව ගුණාත්මක. අපගේ නිෂ්පාදන කර්මාන්තයේ විශිෂ්ඨ කීර්ති නාමයක් ලබා ඇති අතර නව හා පැරණි පාරිභෝගිකයින් අතර විශ්වාසනීයභාවය අගය කරයි.
- දුරකථන: +86 010-59822688
- ගොඩනැගිල්ල 5, අංක 86, ෂුවාන්ගිං බටහිර පාර, චැංග්පිං දිස්ත්රික්කය, බීජිං.
- people@tiangen.com
