ටියාන්කොම්බි ඩීඑන්ඒ ලයිස් සහ ඩෙට් පීසීආර් කට්ටලය

පීසීආර් හඳුනා ගැනීම සඳහා විවිධ ද්‍රව්‍ය වලින් ඩීඑන්ඒ වේගයෙන් පිරිසිදු කිරීම.

වේගවත් ජානමය ඩීඑන්ඒ සැකසීම සහ පීසීආර් විස්තාරණය සඳහා සියළුම ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඇතුළත් සුවිශේෂී ඇසුරුම්කරණ සැලසුමක් ටියැන්කොම්බි ඩීඑන්ඒ ලයිස් ඇන්ඩ් ඩෙට් පීසීආර් කට්ටලය අනුගමනය කරයි. විවිධ සාම්පල වලින් (ශාක පටක, බීජ, සත්ව පටක, රුධිරය, යීස්ට් සහ බැක්ටීරියා) එක් පියවරක ජානමය DNA පවිත්‍රකරණය සහ පසුව සිදු වූ PCR වර්‍ධනය හා හඳුනා ගැනීම සඳහා එය අදාළ වේ. සමස්ත පිරිසිදු කිරීමේ ක්‍රියාවලියේදී ප්‍රෝටීන්, ආර්එන්ඒ සහ අනෙකුත් ද්විතියික පරිවෘත්තීය ද්‍රව්‍ය ඉවත් කිරීම, කාබනික ද්‍රාවක නිස්සාරණය මෙන්ම එතනෝල් වර්ෂාපතන පියවරයන් අවශ්‍ය නොවන අතර එමඟින් ක්‍රියාවලිය සරල හා වේගවත් වේ. නිෂ්පාදනයේ ගුණාත්මකභාවය ස්ථාවර හා විශ්වාසදායකයි.

මෙම කට්ටලය මඟින් ලබා දෙන 2 × ඩෙට් පීසීආර් මාස්ටර්මික්ස් යනු ප්‍රෝටීන් වැනි අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කිරීමේ අවශ්‍යතාවයකින් තොරව ඩීඑන්ඒ කාර්යක්ෂමව හා විශේෂයෙන් වැඩිදියුණු කළ හැකි ඉතා අනුකූල පීසීආර් ප්‍රතික්‍රියාකාරකයකි. මෙම ප්‍රතික්‍රියාකාරකයේ ටැක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස්, ඩීඑන්ටීපී, එම්ජීසීඑල් අඩංගු වේ2, බෆරය මෙන්ම පීසීආර් ප්‍රතික්‍රියාව සඳහා වැඩි දියුණු කරන්නා, ප්‍රශස්තකාරක සහ ස්ථායීකාරක. ප්‍රතික්‍රියාකාරක යෙදීමෙන් පීසීආර් ප්‍රතික්‍රියාව වේගවත්, සරල, සංවේදී, නිශ්චිත හා ස්ථායී වේ. එම නිසා මෙම කට්ටලය විශේෂයෙන් ඉහළ තිරස් පරීක්‍ෂණය සඳහා සුදුසු ය.

පූසා. නැත ඇසුරුම් ප්‍රමාණය
4992527 20 µl × 50 rxn
4992528 20 µl × 200 rxn

 

 


නිෂ්පාදන විස්තර

පර්යේෂණාත්මක උදාහරණය

නිති අසන පැණ

නිෂ්පාදන ටැග්

විශේෂාංග

And සරල හා වේගවත්: දියර නයිට්‍රජන් ඇඹරීමකින් තොරව මිනිත්තු 5 කින් විවිධ පටක වල ඩීඑන්ඒ ලබා ගත හැකිය.
Applications පුළුල් යෙදීම්: ශාක පත්‍ර, බීජ, සත්ත්ව පටක, රුධිර සාම්පල (නැවුම් රුධිරය, ප්‍රතිදේහජනක රුධිර කැටි ගැසීම, වියලි ලේ පැල්ලම් ආදිය), යීස්ට් සහ බැක්ටීරියා සඳහා අදාළ වේ.
Comp දැඩි අනුකූලතාව: විවිධ සාම්පල ප්‍රභවයන්ගෙන් ලබාගත් ඩීඑන්ඒ වර්‍ධනය සඳහා පීසීආර් ප්‍රතික්‍රියාකාරකය සුදුසු ය.

අයදුම්පත්

Ene ජාන හඳුනා ගැනීම: මහා පරිමාණ ජාන හඳුනා ගැනීම සඳහා කදිම තේරීම.

වැදගත් සටහන්

Cotton කපු කොළ වැනි ඉහළ මට්ටමේ ෆීෙනෝල් අඩංගු සාම්පල සඳහා නියැදි ආදාන ප්‍රමාණය 0.4 mg ට වඩා අඩු විය යුතු අතර එසේ නොවුවහොත් PCR ප්‍රතික්‍රියාවට බලපෑම් ඇති වේ.

සියලුම නිෂ්පාදන ODM/OEM සඳහා රිසිකරණය කළ හැකිය. විස්තර සඳහා,කරුණාකර අභිරුචි සේවාව (ODM/OEM) ක්ලික් කරන්න


  • කලින්:
  • ඊළඟ:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Exampl ඉරිඟු, තිරිඟු, සහල්, සෝයා බෝංචි සහ කපු වල කොළ වලින් මිලිග්‍රෑම් 5 ක් සහ බීජ වලින් ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කර ඇත. ඩීඑන්ඒ විශේෂිත ප්‍රාථමික භාවිතා කර පීසීආර් මඟින් වැඩි කරන ලදි. මුළු μl ඉයුරන්ට් 20 න් 6 μl ඩීඑන්ඒ පටුමගකට පටවා ඇත.
    1: ධන පාලන ජෙනෝමය; 2: සාම්පල තබන්න; 3: බීජ සාම්පල; 4: එන්ටීසී; 5: ඩී 2000 ප්‍රයිමර්
    Experimental Example එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් ඩී 2000; 1: ධනාත්මක පාලනය;
    2-7: පෙරහන කඩදාසි වල ඇති වියලි ලේ පැල්ලම් ගණන පිළිවෙලින් 1-6; 8: Neණාත්මක පාලනය.
    නිස්සාරණ පරීක්‍ෂණය සඳහා ද්‍රව්‍ය වශයෙන් පෙරහන කඩදාසියේ වියළි ලේ පැල්ලම් ලබා ගැනීමට මිලිමීටර් 3 පන්චරය භාවිතා කරන ලදී.
    මුළු μl ඉයුරන්ට් 20 න් 6 μl ඩීඑන්ඒ පටුමගකට පටවා ඇත.
    Experimental Exampl එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් ඩී 2000; 1: ධනාත්මක පාලනය (ජානමය ඩීඑන්ඒ අච්චුව ලෙස භාවිතා කරන ලදි); 2-7: එකතු කළ රුධිර ප්‍රමාණය පිළිවෙලින් 10 ,l, 20 ,l, 30 μl, 40 μl, 50 μl සහ 60 μl වේ; 8-13: එකතු කළ රුධිර ප්‍රමාණය පිළිවෙලින් 10 ,l, 20 ,l, 30 μl, 40 μl, 50 μl සහ 60 μl වේ; 14: එන්ටීසී.
    මුළු μl ද්‍රව්‍ය 20 න් 6 μl ඩීඑන්ඒ ඇගරෝස් ජෙල් මත පටවන ලදි.
    ප්‍ර: විස්තාරණ පටි නොමැත

    A-1 සැකිල්ල

    Temp අච්චුවේ ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය හෝ ටාක් නිෂේධක ආදිය අඩංගු වේ - ඩීඑන්ඒ සැකිල්ල පිරිසිදු කරන්න, ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කරන්න හෝ පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල සමඟ ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කරන්න.

    Temp සැකිල්ල අවලංගු කිරීම සම්පුර්ණ නැත ——අනුශ්‍රිත කිරීමේ උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස ඉහළ නංවන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.

    Mp අච්චු පිරිහීම ——අච්චුව නැවත සකස් කරන්න.

    ඒ -2 ප්‍රයිමර්

    ප්‍රයිමර් වල දුර්වල ගුණාත්මකභාවය ——ප්‍රථමකය නැවත සංස්ලේෂණය කරන්න.

    ■ ප්‍රාථමික පිරිහීම —— සංරක්‍ෂණය සඳහා ඉහළ සාන්ද්‍රණ ප්‍රයිමර් කුඩා පරිමාවක් බවට පත් කරන්න. බහු ශීත කිරීම සහ දියවීම හෝ දිගු කාලීන 4 ° C ක්‍රියෝප්‍රීසර්වඩ් කිරීමෙන් වළකින්න.

    ප්‍රයිමර් වල නුසුදුසු සැලසුම (උදා: ප්‍රයිමර් දිග ප්‍රමාණවත් නොවීම, ප්‍රයිමර් අතර සෑදු ඩිමර් ආදිය) -ප්‍රතිනිර්මාණ ප්‍රයිමර් (ප්‍රයිමර් ඩිමර් සහ ද්විතීයික ව්‍යුහය සෑදීමෙන් වළකින්න)

    ඒ -3 මි.මී.2+සාන්ද්රණය

    G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්‍රණය.

    A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය

    ඉහළ උෂ්ණත්වය ඉහළ යාම සහ ප්‍රාථමිකය සහ සැකිල්ල බන්ධනයට බලපායි. ————————————————————————————————————————————————————22 ° C ක අනුක්‍රමණයකින් තත්වය වැඩි දියුණු කරන්න.

    A-5 දිගු කිරීමේ කාලය

    Extension කෙටි දිගු කාලය —— දිගු කිරීමේ කාලය වැඩි කිරීම.

    ප්රශ්නය: වැරදි ධනාත්මක

    සංසිද්ධි: samplesණාත්මක සාම්පල මඟින් ඉලක්කගත අනුක්‍රමික කලාප ද පෙන්වයි.

    A-1 PCR දූෂණය වීම

    Target ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල හෝ විස්තාරණ නිෂ්පාදන වල හරස් දූෂණය - theණාත්මක සාම්පලයේ ඉලක්කගත අනුක්‍රමය අඩංගු නියැදිය නියමාකාරයෙන් නල මාර්ගයට ගෙන ඒම හෝ කේන්ද්‍රාපසාරී නලයෙන් පිටතට වත් නොකිරීම. පවතින න්‍යෂ්ටික අම්ල ඉවත් කිරීම සඳහා ප්‍රතික්‍රියාකාරක හෝ උපකරණ ස්වයංක්‍රීයව සවි කළ යුතු අතර negativeණාත්මක පාලන අත්හදා බැලීම් තුළින් අපවිත්‍ර වීමේ පැවැත්ම තීරණය කළ යුතුය.

    Ag ප්‍රතික්‍රියාකාරක අපවිත්‍ර වීම —— ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඉවත් කර අඩු උෂ්ණත්වයක ගබඩා කරන්න.

    ඒ -2 ප්‍රයිම්r

    G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්‍රණය.

    Pri නුසුදුසු ප්‍රාථමික සැලසුම සහ ඉලක්කගත අනුපිළිවෙලට ඉලක්ක නොවන අනුපිළිවෙල සමඟ සමජාතීයතාවයක් ඇත. ——ප්‍රාථමිකයන් නැවත සැලසුම් කරන්න.

    ප්‍ර: නිශ්චිත නොවන විස්තාරණය

    සංසිද්ධි: පීසීආර් ඇම්ප්ලිෆිකේෂන් බෑන්ඩ් අපේක්‍ෂිත ප්‍රමාණයට නොගැලපේ, විශාල හෝ කුඩා හෝ සමහර විට විශේෂිත විස්තාරණ පටි සහ විශේෂිත නොවන විස්තාරණ පටි.

    ඒ -1 ප්‍රයිමර්

    Pri දුර්වල ප්‍රාථමික විශේෂතා

    —— නැවත සැලසුම් කිරීමේ ප්‍රාථමිකය.

    Pri ප්‍රාථමික සාන්ද්‍රණය ඉතා ඉහළයි ——අනුකරණය කිරීමේ උෂ්ණත්වය නියමිත ලෙස වැඩි කරන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.

    ඒ -2 මිග්2+ සාන්ද්රණය

    G එම්ජී2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg2+ සාන්ද්‍රණය නිවැරදිව අඩු කරන්න: එම්ජී උපරිම කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්‍රණය.

    ඒ -3 තාප ස්ථායී පොලිමරේස්

    En අතිරික්ත එන්සයිම ප්‍රමාණය —— 0.5 යූ කාල පරතරයන් තුළ එන්සයිම ප්‍රමාණය සුදුසු ලෙස අඩු කරන්න.

    A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය

    Neඅනෙහි උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුයි ——අනුරූපී උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස වැඩි කිරීම හෝ අදියර දෙකක ඇනීමේ ක්‍රමය අනුගමනය කිරීම

    A-5 PCR චක්‍ර

    PCR චක්‍ර ඕනෑවට වඩා —— PCR චක්‍ර ගණන අඩු කරන්න.

    ප්රශ්නය: පැච්ටි හෝ ස්මර් බෑන්ඩ්

    ඒ -1 ප්‍රයිමර්————————————————————Oor නැතහොත් කූඩු කළ PCR සිදු කරන්න.

    ඒ -2 ආකෘති ඩීඑන්ඒ

    --— සැකිල්ල පිරිසිදු නැත ————————————————————————————————————

    ඒ -3 මි.මී.2+ සාන්ද්රණය

    ——Mg2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg නිසි ලෙස අඩු කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්‍රණය.

    A-4 dNTP

    - ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්‍රණය ඉතා ඉහළ ය - ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්‍රණය නිසි පරිදි අඩු කරන්න

    A-5 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය

    —————————————————————————————————————————————————————————————————

    ඒ -6 පාපැදි

    —————————————————————————————————————————————————————————————————————————

    Q: 50 μl PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතියක ඩීඑන්ඒ කොපමණ ප්‍රමාණයක් එකතු කළ යුතුද?
    ytry
    Q: දිගු කොටස් විස්තාරණය කරන්නේ කෙසේද?

    පළමු පියවර වන්නේ සුදුසු පොලිමරේස් තෝරා ගැනීමයි. නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් වලට 3'-5 'එක්සෝනියුක්ලීස් ක්‍රියාකාරිත්වය නොමැතිකම නිසා සෝදුපත් කියවිය නොහැකි අතර නොගැලපීම මඟින් කොටස් වල දිගු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව බෙහෙවින් අඩු කරයි. එම නිසා නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් මඟින් 5 kb ට වඩා වැඩි ඉලක්ක කොටස් ඵලදායීව විස්තාරණය කළ නොහැක. දීර්ඝ කිරීමේ කාර්‍යක්‍ෂමතාව ඉහළ නැංවීම සහ දිගු කොටස් විස්තාරණ කිරීමේ අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා විශේෂ වෙනස් කිරීම් සහිත ටැක් පොලිමරේස් හෝ වෙනත් ඉහළ විශ්වාසවන්ත පොලිමරේස් තෝරා ගත යුතුය. ඊට අමතරව, දිගු කොටස් විස්තාරණය කිරීම සඳහා ප්‍රාථමික සැලසුම, විරූපණය කිරීමේ කාලය, දිගු කිරීමේ කාලය, ස්වාරක්ෂක පීඑච් යනාදිය ද ඊට අනුරූපව ගැලපීම අවශ්‍ය වේ. සාමාන්‍යයෙන් 18-24 බීපී සහිත ප්‍රයිමර් මඟින් හොඳ අස්වැන්නක් ලබා ගත හැකිය. සැකිල්ලට වන හානිය වළක්වා ගැනීම සඳහා, 94 ° C දී විරේචනය වීමේ කාලය එක් චක්‍රයකට තත්පර 30 ක් හෝ ඊට අඩු කළ යුතු අතර, විස්තාරණය වීමට පෙර උෂ්ණත්වය 94 ° C දක්වා ඉහළ නැංවීමේ කාලය මිනිත්තු 1 කට වඩා අඩු විය යුතුය. එපමණක් නොව, දිගු කිරීමේ උෂ්ණත්වය 68 ° C පමණ දක්වා සකස් කිරීම සහ දීර්ඝ කිරීමේ කාලය 1 kb/min අනුපාතය අනුව සැලසුම් කිරීමෙන් දිගු කොටස් වල ඵලදායී විස්තාරණය සහතික කළ හැකිය.

    ප්‍ර: පීසීආර් හි විස්තාරණ විශ්වාසවන්තභාවය වැඩි දියුණු කරන්නේ කෙසේද?

    ඉහළ විශ්වාසවන්ත භාවයකින් යුත් විවිධ ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් භාවිතා කිරීමෙන් පීසීආර් විස්තාරණයේ වැරදි අනුපාතය අඩු කළ හැකිය. මෙතෙක් සොයාගෙන ඇති සියලුම ටාක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් අතර, පීඑෆ්යු එන්සයිමයේ අවම දෝෂ අනුපාතය සහ ඉහළම විශ්වාසවන්තභාවය ඇත (අමුණා ඇති වගුව බලන්න). එන්සයිම තෝරා ගැනීමට අමතරව, පර්යේෂකයන්ට පීසීආර් විකෘති අනුපාතය තවදුරටත් අඩු කළ හැකි අතර එමඟින් බෆර් සංයුතිය ප්‍රශස්ත කිරීම, තාප ස්ථායී පොලිමරේස් සාන්ද්‍රණය සහ පීසීආර් චක්‍ර අංකය ප්‍රශස්තිකරණය කිරීම ඇතුළත් වේ.

    ඔබේ පණිවිඩය මෙහි ලියා අප වෙත එවන්න