රුධිර Pජු PCR කට්ටලය
විශේෂාංග
And සරල හා වේගවත්: නියැදි සැකසීම සහ ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කිරීමේ වෙහෙසකාරී පියවරයන්ගෙන් තොරව, රුධිර අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරමින් පීසීආර් විස්තාරණය සෘජුවම සිදු කළ හැකිය.
Pur ඉහළ සංශුද්ධතාවය: සාම්පල පූර්ව ප්‍රතිකාර හා ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණ පියවර මඟ හැරීම සාම්පල වල හරස් දූෂණය වීම වළක්වා ගැනීමට උපකාරී වේ.
Through ඉහළ ප්‍රතිදානය: 96/384 ළිං සහිත පීසීආර් තහඩු සමඟ කට්ටලය සම්බන්ධ කිරීමෙන් මහා පරිමාණ සාම්පල සඳහා පීසීආර් හඳුනා ගැනීම සිදු කළ හැකිය.
Univers ශක්තිමත් විශ්වීයත්වය: මෙම කට්ටලයට සංකීර්ණ ද්විතීයික ව්‍යුහයක් සහිත උසස් ජීසී කොටස් හෝ කැබලි කාර්‍යක්‍ෂමව විස්තාරණය කළ හැකි අතර විස්තාරණ දිග 5 කි.බි.
Stress දැඩි ආතති ප්‍රතිරෝධය: විවිධ වර්‍ග වලින් ආරක්‍ෂා කර ඇති විවිධ විශේෂ සහ රුධිර සාම්පල සඳහා මෙම කට්ටලය යෙදිය හැකිය.
අයදුම්පත්
මෙම කට්ටලයේ පීසීආර් නිෂ්පාදන 3′-අන්තයේ “ඒ” අඩංගු වන අතර එය ටීඒ දෛශික ක්ලෝනකරණය සඳහා කෙලින්ම භාවිතා කළ හැකිය. මෙම කට්ටලය ජානමය ඩීඑන්ඒ කොටස් විස්තාරණය කිරීම, ඉහළ ප්‍රතිඵලයක් ඇති ජානමය විශ්ලේෂණය සහ ජාන සැකසීම (ජාන හඳුනා ගැනීම වැනි) විශ්ලේෂණය සඳහා භාවිතා කළ හැකිය.
සියලුම නිෂ්පාදන ODM/OEM සඳහා රිසිකරණය කළ හැකිය. විස්තර සඳහා,කරුණාකර අභිරුචි සේවාව (ODM/OEM) ක්ලික් කරන්න
 |
මානව ඊඩීටීඒ ප්‍රතිදේහජනක සැකිල්ලක් ලෙස භාවිතා කරමින් විවිධ ජීසී අන්තර්ගතයන් සහිත ජාන 4 ක් රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලය මඟින් වැඩි දියුණු කරන ලදි. PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතිය 20 μl වූ අතර 1 μl රුධිරය අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් II; 1: කැබලි ප්‍රමාණය 1090 බීපී, ජීසී අන්තර්ගතය 68.1%; 2: කැබලි ප්‍රමාණය 1915 බීපී, ජීසී අන්තර්ගතය 70.4%; 3: කැබලි ප්‍රමාණය 448 බීපී, ජීසී අන්තර්ගතය 74.8%; 4: කැබලි ප්‍රමාණය 1527 බීපී, ජීසී අන්තර්ගතය 61.5%. පර්යේෂණාත්මක ප්‍රතිඵල: රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලයට ජීසී අන්තර්ගතය සමඟ ඩීඑන්ඒ කොටස් 61.5%-74.8%ක පරාසයක ඵලදායීව විස්තාරණය කළ හැකි අතර එයින් ඇඟවෙන්නේ උසස් ජීසී කොටස් වැඩි කිරීමේ හැකියාව ඇති බවයි. |
 |
මානව ඊඩීටීඒ ප්‍රතිදේහජනක සැකිල්ල ලෙස භාවිතා කරමින් විවිධ දිගකින් යුත් ජාන 5 ක් (ඇක්ට්බී, පීආර්පී, ඩීඑන් 1.0, එච්එන් 2.0 සහ එච්එන් 4.0) රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලය මඟින් වැඩි දියුණු කරන ලදි. PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතිය 20 μl වූ අතර 1 μl රුධිරය අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් II; 1-3: විවිධ රුධිර සාම්පල 3 ක්; NTC: ප්‍රයිමර් නොමැතිව පාලනය කිරීම. පර්යේෂණාත්මක ප්‍රතිඵල: බ්ලඩ් ඩිරෙක්ට් පීසීආර් කට්ටලයට 4 kb තරම් දිග කැබලි වැඩි කළ හැකි අතර එයින් ඇඟවෙන්නේ දිගු කොටස් විස්තාරණය කිරීමේ හැකියාව ඇති බවයි. |
 |
මානව ඊඩීටීඒ ප්‍රතිදේහජනක සැකිල්ල ලෙස භාවිතා කරමින් විවිධ රුධිර සාම්පල පීසීආර් හඳුනා ගැනීම සඳහා රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලය භාවිතා කරන ලදී. PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතිය 20 μl වූ අතර 1 μl රුධිරය අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් II; 1-9: රුධිරය පැටවීමේ ප්‍රමාණය පිළිවෙලින් 0.1 μl, 0.2 μl, 0.3 μl, 0.4 ,l, 1 μl, 2 μl, 3 μl, 4 μl සහ 5 μl වේ; NTC: අච්චුවක් නොමැතිව පාලනය කිරීම පර්යේෂණාත්මක ප්‍රතිඵල: රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලය රුධිරයට දැඩි ප්‍රතිරෝධයක් දක්වන අතර 0.1-5 loadl පැටවීමේ පරාසය සමඟ රුධිර සාම්පල වැඩි කළ හැකිය. |
 |
මිනිස්, මී, කුකුළු මස් සහ වෙනත් සත්ත්ව විශේෂ වල රුධිර සාම්පල සැකිලි ලෙස භාවිතා කරන ලදී. PRNP (මානව, 750 bp), ඇක්ටින් (මී, 200 bp) සහ β-Actin (කුකුළු මස්, 1.0 kb) වැඩි දියුණු කිරීම සඳහා රුධිර Pජු PCR කට්ටලය භාවිතා කරන ලදී. PCR ප්‍රතික්‍රියා පද්ධතිය 20 μl වූ අතර 1 μl රුධිරය අච්චුවක් ලෙස භාවිතා කරන ලදී. එම්: ටියැන්ජන් මාර්කර් II. පර්යේෂණාත්මක ප්‍රතිඵල: පුළුල් පරාසයක සාම්පල මත රුධිර Pජු පීසීආර් කට්ටලය යෙදිය හැකි අතර, විවිධ සත්ත්ව විශේෂ වල රුධිර සාම්පල මත Pජුවම පීසීආර් හඳුනා ගැනීම විවිධ ප්‍රතිකාර මඟින් සිදු කළ හැකිය. |
A-1 සැකිල්ල
Temp අච්චුවේ ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය හෝ ටාක් නිෂේධක ආදිය අඩංගු වේ - ඩීඑන්ඒ සැකිල්ල පිරිසිදු කරන්න, ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කරන්න හෝ පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල සමඟ ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කරන්න.
Temp සැකිල්ල අවලංගු කිරීම සම්පුර්ණ නැත ——අනුශ්‍රිත කිරීමේ උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස ඉහළ නංවන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
Mp අච්චු පිරිහීම ——අච්චුව නැවත සකස් කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිමර්
ප්‍රයිමර් වල දුර්වල ගුණාත්මකභාවය ——ප්‍රථමකය නැවත සංස්ලේෂණය කරන්න.
■ ප්‍රාථමික පිරිහීම —— සංරක්‍ෂණය සඳහා ඉහළ සාන්ද්‍රණ ප්‍රයිමර් කුඩා පරිමාවක් බවට පත් කරන්න. බහු ශීත කිරීම සහ දියවීම හෝ දිගු කාලීන 4 ° C ක්‍රියෝප්‍රීසර්වඩ් කිරීමෙන් වළකින්න.
ප්‍රයිමර් වල නුසුදුසු සැලසුම (උදා: ප්‍රයිමර් දිග ප්‍රමාණවත් නොවීම, ප්‍රයිමර් අතර සෑදු ඩිමර් ආදිය) -ප්‍රතිනිර්මාණ ප්‍රයිමර් (ප්‍රයිමර් ඩිමර් සහ ද්විතීයික ව්‍යුහය සෑදීමෙන් වළකින්න)
ඒ -3 මි.මී.2+සාන්ද්රණය
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
ඉහළ උෂ්ණත්වය ඉහළ යාම සහ ප්‍රාථමිකය සහ සැකිල්ල බන්ධනයට බලපායි. ————————————————————————————————————————————————————22 ° C ක අනුක්‍රමණයකින් තත්වය වැඩි දියුණු කරන්න.
A-5 දිගු කිරීමේ කාලය
Extension කෙටි දිගු කාලය —— දිගු කිරීමේ කාලය වැඩි කිරීම.
සංසිද්ධි: samplesණාත්මක සාම්පල මඟින් ඉලක්කගත අනුක්‍රමික කලාප ද පෙන්වයි.
A-1 PCR දූෂණය වීම
Target ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල හෝ විස්තාරණ නිෂ්පාදන වල හරස් දූෂණය - theණාත්මක සාම්පලයේ ඉලක්කගත අනුක්‍රමය අඩංගු නියැදිය නියමාකාරයෙන් නල මාර්ගයට ගෙන ඒම හෝ කේන්ද්‍රාපසාරී නලයෙන් පිටතට වත් නොකිරීම. පවතින න්‍යෂ්ටික අම්ල ඉවත් කිරීම සඳහා ප්‍රතික්‍රියාකාරක හෝ උපකරණ ස්වයංක්‍රීයව සවි කළ යුතු අතර negativeණාත්මක පාලන අත්හදා බැලීම් තුළින් අපවිත්‍ර වීමේ පැවැත්ම තීරණය කළ යුතුය.
Ag ප්‍රතික්‍රියාකාරක අපවිත්‍ර වීම —— ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඉවත් කර අඩු උෂ්ණත්වයක ගබඩා කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිම්r
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
Pri නුසුදුසු ප්‍රාථමික සැලසුම සහ ඉලක්කගත අනුපිළිවෙලට ඉලක්ක නොවන අනුපිළිවෙල සමඟ සමජාතීයතාවයක් ඇත. ——ප්‍රාථමිකයන් නැවත සැලසුම් කරන්න.
සංසිද්ධි: පීසීආර් ඇම්ප්ලිෆිකේෂන් බෑන්ඩ් අපේක්‍ෂිත ප්‍රමාණයට නොගැලපේ, විශාල හෝ කුඩා හෝ සමහර විට විශේෂිත විස්තාරණ පටි සහ විශේෂිත නොවන විස්තාරණ පටි.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්
Pri දුර්වල ප්‍රාථමික විශේෂතා
—— නැවත සැලසුම් කිරීමේ ප්‍රාථමිකය.
Pri ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළයි ——අනුකරණය කිරීමේ උෂ්ණත්වය නියමිත ලෙස වැඩි කරන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
ඒ -2 මිග්2+ සාන්ද්රණය
G එම්ජී2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg2+ සාන්ද්රණය නිවැරදිව අඩු කරන්න: එම්ජී උපරිම කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
ඒ -3 තාප ස්ථායී පොලිමරේස්
En අතිරික්ත එන්සයිම ප්‍රමාණය —— 0.5 යූ කාල පරතරයන් තුළ එන්සයිම ප්‍රමාණය සුදුසු ලෙස අඩු කරන්න.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
Neඅනෙහි උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුයි ——අනුරූපී උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස වැඩි කිරීම හෝ අදියර දෙකක ඇනීමේ ක්‍රමය අනුගමනය කිරීම
A-5 PCR චක්‍ර
PCR චක්‍ර ඕනෑවට වඩා —— PCR චක්‍ර ගණන අඩු කරන්න.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්————————————————————Oor නැතහොත් කූඩු කළ PCR සිදු කරන්න.
ඒ -2 ආකෘති ඩීඑන්ඒ
--— සැකිල්ල පිරිසිදු නැත ————————————————————————————————————
ඒ -3 මි.මී.2+ සාන්ද්රණය
——Mg2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg නිසි ලෙස අඩු කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 dNTP
- ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය - ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය නිසි පරිදි අඩු කරන්න
A-5 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
—————————————————————————————————————————————————————————————————
ඒ -6 පාපැදි
—————————————————————————————————————————————————————————————————————————
පළමු පියවර වන්නේ සුදුසු පොලිමරේස් තෝරා ගැනීමයි. නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් වලට 3'-5 'එක්සෝනියුක්ලීස් ක්‍රියාකාරිත්වය නොමැතිකම නිසා සෝදුපත් කියවිය නොහැකි අතර නොගැලපීම මඟින් කොටස් වල දිගු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව බෙහෙවින් අඩු කරයි. එම නිසා නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් මඟින් 5 kb ට වඩා වැඩි ඉලක්ක කොටස් ඵලදායීව විස්තාරණය කළ නොහැක. දීර්ඝ කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව ඉහළ නැංවීම සහ දිගු කොටස් විස්තාරණ කිරීමේ අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා විශේෂ වෙනස් කිරීම් සහිත ටැක් පොලිමරේස් හෝ වෙනත් ඉහළ විශ්වාසවන්ත පොලිමරේස් තෝරා ගත යුතුය. ඊට අමතරව, දිගු කොටස් විස්තාරණය කිරීම සඳහා ප්‍රාථමික සැලසුම, විරූපණය කිරීමේ කාලය, දිගු කිරීමේ කාලය, ස්වාරක්ෂක පීඑච් යනාදිය ද ඊට අනුරූපව ගැලපීම අවශ්‍ය වේ. සාමාන්‍යයෙන් 18-24 බීපී සහිත ප්‍රයිමර් මඟින් හොඳ අස්වැන්නක් ලබා ගත හැකිය. සැකිල්ලට වන හානිය වළක්වා ගැනීම සඳහා, 94 ° C දී විරේචනය වීමේ කාලය එක් චක්‍රයකට තත්පර 30 ක් හෝ ඊට අඩු කළ යුතු අතර, විස්තාරණය වීමට පෙර උෂ්ණත්වය 94 ° C දක්වා ඉහළ නැංවීමේ කාලය මිනිත්තු 1 කට වඩා අඩු විය යුතුය. එපමණක් නොව, දිගු කිරීමේ උෂ්ණත්වය 68 ° C පමණ දක්වා සකස් කිරීම සහ දීර්ඝ කිරීමේ කාලය 1 kb/min අනුපාතය අනුව සැලසුම් කිරීමෙන් දිගු කොටස් වල ඵලදායී විස්තාරණය සහතික කළ හැකිය.
ඉහළ විශ්වාසවන්ත භාවයකින් යුත් විවිධ ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් භාවිතා කිරීමෙන් පීසීආර් විස්තාරණයේ වැරදි අනුපාතය අඩු කළ හැකිය. මෙතෙක් සොයාගෙන ඇති සියලුම ටාක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් අතර, පීඑෆ්යු එන්සයිමයේ අවම දෝෂ අනුපාතය සහ ඉහළම විශ්වාසවන්තභාවය ඇත (අමුණා ඇති වගුව බලන්න). එන්සයිම තෝරා ගැනීමට අමතරව, පර්යේෂකයන්ට පීසීආර් විකෘති අනුපාතය තවදුරටත් අඩු කළ හැකි අතර එමඟින් බෆර් සංයුතිය ප්‍රශස්ත කිරීම, තාප ස්ථායී පොලිමරේස් සාන්ද්රණය සහ පීසීආර් චක්‍ර අංකය ප්‍රශස්තිකරණය කිරීම ඇතුළත් වේ.
නිෂ්පාදන කාණ්ඩ
අපව තෝරා ගන්නේ ඇයි
අපගේ කර්මාන්ත ශාලාව පිහිටුවීමෙන් පසු මූලධර්මය පිළිපදිමින් පළමු ලෝක මට්ටමේ නිෂ්පාදන සංවර්ධනය කරමින් සිටියේය
පළමුව ගුණාත්මක. අපගේ නිෂ්පාදන කර්මාන්තයේ විශිෂ්ඨ කීර්ති නාමයක් ලබා ඇති අතර නව හා පැරණි පාරිභෝගිකයින් අතර විශ්වාසනීයභාවය අගය කරයි.
- දුරකථන: +86 010-59822688
- ගොඩනැගිල්ල 5, අංක 86, ෂුවාන්ගිං බටහිර පාර, චැංග්පිං දිස්ත්රික්කය, බීජිං.
- people@tiangen.com
