වේගවත් අඩවි අධ්‍යක්ෂණය කරන ලද විකෘති උත්පාදන කට්ටලය
විශේෂාංග
■ සරල හා වේගවත්: කට්ටලය කෙඳි නොවන ආදේශක ප්ලාස්මිඩ් ඇම්ප්ලිෆිකේෂන් තාක්‍ෂණය භාවිතා කරයි. පීසීආර් වට කිහිපයක් සහ උප ක්ලෝන කිරීම වැනි කාලය නාස්ති කිරීමේ හා ශ්‍රමය වැයවන පියවරයන් නොමැතිව වල් ආකාරයේ වික්‍රියා වල සිට විකෘති වික්‍රියා දක්වා වෙනස් වීම සාක්‍ෂාත් කර ගැනීමට එයට අවශ්‍ය වන්නේ පියවර 4 ක් පමණි.
■ ඉහළ කාර්‍යක්‍ෂමතා ප්‍රාථමිකය: ප්‍රාථමික සැලසුම අර්ධ වශයෙන් අතිච්ඡාදනය කිරීමේ මූලධර්මය මෙම කට්ටලය අනුගමනය කරන අතර එමඟින් වැඩි දියුණු කිරීමෙන් වැඩි විකෘති ප්ලාස්මිඩ් ලබා ගත හැකිය.
පුළුල් ලෙස අදාළ වේ: කට්ටලයට තනි ස්ථාන විකෘති කිරීම් පමණක් නොව බහු-ස්ථාන විකෘති කිරීම් ද සිදු කළ හැකිය. එය වෙබ් අඩවි 5 ක් දක්වා විකෘති කළ හැකිය.
Adap දැඩි අනුවර්තනය වීමේ හැකියාව: මෙම කට්ටලයට සාමාන්‍යයෙන් බහුලව භාවිතා වන ප්ලාස්මිඩ් සියල්ල ආවරණය වන පරිදි උපරිම 10 kb ප්‍රමාණයේ ප්ලාස්මිඩ් මත වෙබ් අඩවියෙන් යොමු වූ විකෘති කිරීම් සිදු කළ හැකිය.
Mut ඉහළ විකෘති අනුපාතය: ඉහළ විකෘති අනුපාතය සහතික කරමින් මෙතිලේට් කරන ලද ප්ලාස්මිඩ් සැකිලි වීට්‍රෝ සහ විවෝ තුළ ද්විත්ව දිරවීමේ ක්‍රියාවලිය මෙම කට්ටලයට ඇත.
අඩවි-විකෘති ප්‍රතික්‍රියා සැකසීම සහ පීසීආර් වැඩසටහන
Pri තනි ප්‍රාථමික බහු-ස්ථාන විකෘතිය සඳහා, විකෘති අඩවි සංඛ්‍යාව වැඩි වීම නිසා විකෘති වීමේ අනුපාතය තනි අඩවි විකෘතිතාවයට වඩා අඩු වනු ඇත. අපගේ පර්යේෂණාත්මක දත්ත වලට අනුව, විකෘති අඩවි සංඛ්‍යාව 5 ක් වන විට, විකෘති ධනාත්මක අනුපාතය 50%දක්වා අඩු කෙරේ. එම නිසා, මෙම අවස්ථාවේදී තහවුරු කරන ලද ක්ලෝන ගණන වැඩි කිරීම රෙකමදාරු කරනු ලැබේ.
■ මෙම කට්ටලය බහු-ප්‍රාථමික බහු-වෙබ් අඩවි විකෘතියට සහය වන අතර එමඟින් විකෘති පරීක්ෂණ පුළුල් පරාසයක ජාන තුළ එකවර සිදු කළ හැකිය. විකෘති අඩවි සංඛ්‍යාවේ ඉහළ සීමාව තවමත් 5 කි.
Mut පර්යේෂණාත්මක ගැටලු විශ්ලේෂණය කිරීම පහසු වන පරිදි නව විකෘති අත්හදා බැලීම් සිදු කිරීමේදී කට්ටලයේ සපයන පාලක ප්ලාස්මිඩ් සහ ප්‍රයිමර් යෙදිය යුතු යැයි යෝජනා කෙරේ.
සියලුම නිෂ්පාදන ODM/OEM සඳහා රිසිකරණය කළ හැකිය. විස්තර සඳහා,කරුණාකර අභිරුචි සේවාව (ODM/OEM) ක්ලික් කරන්න
A-1 සැකිල්ල
Temp අච්චුවේ ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය හෝ ටාක් නිෂේධක ආදිය අඩංගු වේ - ඩීඑන්ඒ සැකිල්ල පිරිසිදු කරන්න, ප්‍රෝටීන් අපද්‍රව්‍ය ඉවත් කරන්න හෝ පිරිසිදු කිරීමේ කට්ටල සමඟ ඩීඑන්ඒ නිස්සාරණය කරන්න.
Temp සැකිල්ල අවලංගු කිරීම සම්පුර්ණ නැත ——අනුශ්‍රිත කිරීමේ උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස ඉහළ නංවන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
Mp අච්චු පිරිහීම ——අච්චුව නැවත සකස් කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිමර්
ප්‍රයිමර් වල දුර්වල ගුණාත්මකභාවය ——ප්‍රථමකය නැවත සංස්ලේෂණය කරන්න.
■ ප්‍රාථමික පිරිහීම —— සංරක්‍ෂණය සඳහා ඉහළ සාන්ද්‍රණ ප්‍රයිමර් කුඩා පරිමාවක් බවට පත් කරන්න. බහු ශීත කිරීම සහ දියවීම හෝ දිගු කාලීන 4 ° C ක්‍රියෝප්‍රීසර්වඩ් කිරීමෙන් වළකින්න.
ප්‍රයිමර් වල නුසුදුසු සැලසුම (උදා: ප්‍රයිමර් දිග ප්‍රමාණවත් නොවීම, ප්‍රයිමර් අතර සෑදු ඩිමර් ආදිය) -ප්‍රතිනිර්මාණ ප්‍රයිමර් (ප්‍රයිමර් ඩිමර් සහ ද්විතීයික ව්‍යුහය සෑදීමෙන් වළකින්න)
ඒ -3 මි.මී.2+සාන්ද්රණය
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
ඉහළ උෂ්ණත්වය ඉහළ යාම සහ ප්‍රාථමිකය සහ සැකිල්ල බන්ධනයට බලපායි. ————————————————————————————————————————————————————22 ° C ක අනුක්‍රමණයකින් තත්වය වැඩි දියුණු කරන්න.
A-5 දිගු කිරීමේ කාලය
Extension කෙටි දිගු කාලය —— දිගු කිරීමේ කාලය වැඩි කිරීම.
සංසිද්ධි: samplesණාත්මක සාම්පල මඟින් ඉලක්කගත අනුක්‍රමික කලාප ද පෙන්වයි.
A-1 PCR දූෂණය වීම
Target ඉලක්කගත අනුපිළිවෙල හෝ විස්තාරණ නිෂ්පාදන වල හරස් දූෂණය - theණාත්මක සාම්පලයේ ඉලක්කගත අනුක්‍රමය අඩංගු නියැදිය නියමාකාරයෙන් නල මාර්ගයට ගෙන ඒම හෝ කේන්ද්‍රාපසාරී නලයෙන් පිටතට වත් නොකිරීම. පවතින න්‍යෂ්ටික අම්ල ඉවත් කිරීම සඳහා ප්‍රතික්‍රියාකාරක හෝ උපකරණ ස්වයංක්‍රීයව සවි කළ යුතු අතර negativeණාත්මක පාලන අත්හදා බැලීම් තුළින් අපවිත්‍ර වීමේ පැවැත්ම තීරණය කළ යුතුය.
Ag ප්‍රතික්‍රියාකාරක අපවිත්‍ර වීම —— ප්‍රතික්‍රියාකාරක ඉවත් කර අඩු උෂ්ණත්වයක ගබඩා කරන්න.
ඒ -2 ප්‍රයිම්r
G මෙග්2+ සාන්ද්රණය ඉතා අඩුයි —— Mg නිසි ලෙස වැඩි කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
Pri නුසුදුසු ප්‍රාථමික සැලසුම සහ ඉලක්කගත අනුපිළිවෙලට ඉලක්ක නොවන අනුපිළිවෙල සමඟ සමජාතීයතාවයක් ඇත. ——ප්‍රාථමිකයන් නැවත සැලසුම් කරන්න.
සංසිද්ධි: පීසීආර් ඇම්ප්ලිෆිකේෂන් බෑන්ඩ් අපේක්‍ෂිත ප්‍රමාණයට නොගැලපේ, විශාල හෝ කුඩා හෝ සමහර විට විශේෂිත විස්තාරණ පටි සහ විශේෂිත නොවන විස්තාරණ පටි.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්
Pri දුර්වල ප්‍රාථමික විශේෂතා
—— නැවත සැලසුම් කිරීමේ ප්‍රාථමිකය.
Pri ප්‍රාථමික සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළයි ——අනුකරණය කිරීමේ උෂ්ණත්වය නියමිත ලෙස වැඩි කරන අතර විරේචනය කිරීමේ කාලය වැඩි කරයි.
ඒ -2 මිග්2+ සාන්ද්රණය
G එම්ජී2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg2+ සාන්ද්රණය නිවැරදිව අඩු කරන්න: එම්ජී උපරිම කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
ඒ -3 තාප ස්ථායී පොලිමරේස්
En අතිරික්ත එන්සයිම ප්‍රමාණය —— 0.5 යූ කාල පරතරයන් තුළ එන්සයිම ප්‍රමාණය සුදුසු ලෙස අඩු කරන්න.
A-4 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
Neඅනෙහි උෂ්ණත්වය ඉතා අඩුයි ——අනුරූපී උෂ්ණත්වය යෝග්‍ය ලෙස වැඩි කිරීම හෝ අදියර දෙකක ඇනීමේ ක්‍රමය අනුගමනය කිරීම
A-5 PCR චක්‍ර
PCR චක්‍ර ඕනෑවට වඩා —— PCR චක්‍ර ගණන අඩු කරන්න.
ඒ -1 ප්‍රයිමර්————————————————————Oor නැතහොත් කූඩු කළ PCR සිදු කරන්න.
ඒ -2 ආකෘති ඩීඑන්ඒ
--— සැකිල්ල පිරිසිදු නැත ————————————————————————————————————
ඒ -3 මි.මී.2+ සාන්ද්රණය
——Mg2+ සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය —— Mg නිසි ලෙස අඩු කරන්න2+ සාන්ද්රණය: එම්ජී ප්‍රශස්ත කරන්න2+ ප්‍රශස්ත එම්ජී තීරණය කිරීම සඳහා 0.5 මි.මී.2+ එක් එක් සැකිල්ල සහ ප්‍රාථමිකය සඳහා සාන්ද්රණය.
A-4 dNTP
- ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය ඉතා ඉහළ ය - ඩීඑන්ටීපී සාන්ද්රණය නිසි පරිදි අඩු කරන්න
A-5 සනීපාරක්ෂක උෂ්ණත්වය
—————————————————————————————————————————————————————————————————
ඒ -6 පාපැදි
—————————————————————————————————————————————————————————————————————————
පළමු පියවර වන්නේ සුදුසු පොලිමරේස් තෝරා ගැනීමයි. නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් වලට 3'-5 'එක්සෝනියුක්ලීස් ක්‍රියාකාරිත්වය නොමැතිකම නිසා සෝදුපත් කියවිය නොහැකි අතර නොගැලපීම මඟින් කොටස් වල දිගු කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව බෙහෙවින් අඩු කරයි. එම නිසා නිතිපතා ටැක් පොලිමරේස් මඟින් 5 kb ට වඩා වැඩි ඉලක්ක කොටස් ඵලදායීව විස්තාරණය කළ නොහැක. දීර්ඝ කිරීමේ කාර්යක්ෂමතාව ඉහළ නැංවීම සහ දිගු කොටස් විස්තාරණ කිරීමේ අවශ්‍යතා සපුරාලීම සඳහා විශේෂ වෙනස් කිරීම් සහිත ටැක් පොලිමරේස් හෝ වෙනත් ඉහළ විශ්වාසවන්ත පොලිමරේස් තෝරා ගත යුතුය. ඊට අමතරව, දිගු කොටස් විස්තාරණය කිරීම සඳහා ප්‍රාථමික සැලසුම, විරූපණය කිරීමේ කාලය, දිගු කිරීමේ කාලය, ස්වාරක්ෂක පීඑච් යනාදිය ද ඊට අනුරූපව ගැලපීම අවශ්‍ය වේ. සාමාන්‍යයෙන් 18-24 බීපී සහිත ප්‍රයිමර් මඟින් හොඳ අස්වැන්නක් ලබා ගත හැකිය. සැකිල්ලට වන හානිය වළක්වා ගැනීම සඳහා, 94 ° C දී විරේචනය වීමේ කාලය එක් චක්‍රයකට තත්පර 30 ක් හෝ ඊට අඩු කළ යුතු අතර, විස්තාරණය වීමට පෙර උෂ්ණත්වය 94 ° C දක්වා ඉහළ නැංවීමේ කාලය මිනිත්තු 1 කට වඩා අඩු විය යුතුය. එපමණක් නොව, දිගු කිරීමේ උෂ්ණත්වය 68 ° C පමණ දක්වා සකස් කිරීම සහ දීර්ඝ කිරීමේ කාලය 1 kb/min අනුපාතය අනුව සැලසුම් කිරීමෙන් දිගු කොටස් වල ඵලදායී විස්තාරණය සහතික කළ හැකිය.
ඉහළ විශ්වාසවන්ත භාවයකින් යුත් විවිධ ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් භාවිතා කිරීමෙන් පීසීආර් විස්තාරණයේ වැරදි අනුපාතය අඩු කළ හැකිය. මෙතෙක් සොයාගෙන ඇති සියලුම ටාක් ඩීඑන්ඒ පොලිමරේස් අතර, පීඑෆ්යු එන්සයිමයේ අවම දෝෂ අනුපාතය සහ ඉහළම විශ්වාසවන්තභාවය ඇත (අමුණා ඇති වගුව බලන්න). එන්සයිම තෝරා ගැනීමට අමතරව, පර්යේෂකයන්ට පීසීආර් විකෘති අනුපාතය තවදුරටත් අඩු කළ හැකි අතර එමඟින් බෆර් සංයුතිය ප්‍රශස්ත කිරීම, තාප ස්ථායී පොලිමරේස් සාන්ද්රණය සහ පීසීආර් චක්‍ර අංකය ප්‍රශස්තිකරණය කිරීම ඇතුළත් වේ.
නිෂ්පාදන කාණ්ඩ
අපව තෝරා ගන්නේ ඇයි
අපගේ කර්මාන්ත ශාලාව පිහිටුවීමෙන් පසු මූලධර්මය පිළිපදිමින් පළමු ලෝක මට්ටමේ නිෂ්පාදන සංවර්ධනය කරමින් සිටියේය
පළමුව ගුණාත්මක. අපගේ නිෂ්පාදන කර්මාන්තයේ විශිෂ්ඨ කීර්ති නාමයක් ලබා ඇති අතර නව හා පැරණි පාරිභෝගිකයින් අතර විශ්වාසනීයභාවය අගය කරයි.
- දුරකථන: +86 010-59822688
- ගොඩනැගිල්ල 5, අංක 86, ෂුවාන්ගිං බටහිර පාර, චැංග්පිං දිස්ත්රික්කය, බීජිං.
- people@tiangen.com
